細胞評価および研究

消化器系

栄養吸収の促進・阻害を評価したい
腸管吸収評価試験
 使用細胞:ヒト大腸がん由来Caco-2細胞、ラット小腸由来IEC-6細胞
 評価指標:細胞層を介した試験物質の透過率、アルカリフォスファターゼ(ALP)活性
消化吸収抑制試験
 評価指標:αグルコシダーゼ、リパーゼ、αアミラーゼ活性

整腸作用を調べたい
腸バリア機能評価試験
 使用細胞:Caco-2細胞
 評価指標:経上皮電気抵抗値TERの経時的変化、タイトジャンクション(TJ)形成、Lucifer Yellow添加による透過性
炎症性腸疾患(IBD)改善機能評価試験
 使用細胞:Caco-2細胞、ヒト単球様細胞株THP-1
 モデル作製:Caco-2とTHP-1の共培養系を作製し、炎症を誘導
 評価指標:炎症性サイトカイン産生
便秘改善評価試験(マウス)
 モデル作製:便秘誘発マウス(ロペラミド投与など)
 評価指標:糞便性状(量、水分含量など)
腸内細菌業評価試験(マウス)
 動物モデル:健常マウスまたは疾患モデルマウス
 評価指標:糞便から抽出した細菌DNAの16SリボソームRNA解析による菌種同定と組成比較

肝機能を評価したい
肝解毒機能評価試験
 使用細胞:ヒト由来の肝細胞株(HepG2)
 評価指標:薬物代謝酵素シトクロム酵素(CYP1A2, 2C9, 3A4)、アルコールデヒドロゲナーゼ(ALDH)、胆汁酸トランスポーターの遺伝子発現やタンパク質定量
肝脂肪蓄積・脂肪とコレステロール代謝評価試験
 使用細胞:HepG2細胞
 評価指標:オイルレッドO染色による細胞内脂質蓄積量の定量、培養上清中性脂肪・コレステロールの定量、中性脂肪・コレステロール代謝酵素の活性や遺伝子発現
非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)改善試験(マウス)
 モデル作製:高脂肪食負荷によるマウスNAFLD/NASHモデル
 評価指標:体重、体脂肪量、血中脂質、肝臓重量指数、肝臓病理学的変化など


心血管系

血圧降下・血管内皮機能を評価したい
ACE(アンジオテンシン変換酵素)阻害活性試験
 評価指標:試験物質のACE阻害能を IC50で算出
血管内皮機能評価試験
 使用細胞:ヒト臍帯静脈内皮細胞 (HUVEC)
 評価指標:一酸化窒素(NO)産生、NO産生酵素活性やタンパク質発現
高血圧自然発症マウス(SHR)を用いる評価
 モデル作製:正常または高血圧誘発マウスモデル
 評価指標:全身性血圧変化


運動器系(骨、関節、筋肉)

骨・関節強化作用を評価したい
骨芽細胞と破骨細胞による骨代謝試験
 使用細胞:初代培養骨芽細胞、マウスマクロファージ様細胞株 RAW264.7
 評価指標:骨芽分化遺伝子の検出、細胞の石灰化形成(アリザリン染色)、破骨細胞数、破骨細胞特異的な遺伝子やタンパク質の検出
骨粗鬆症改善評価試験
 モデル作製:卵巣摘出または副腎皮質ステロイド投与によるマウス骨量減少
 評価指標:DXAやマイクロCTによる骨密度、骨強度を評価
軟骨機能評価試験
 使用細胞:マウスATDC5前駆軟骨細胞
 評価指標:アルカリフォスファターゼ活性評価、軟骨細胞外基質産生評価、軟骨細胞の石灰化形成(アリザリン染色)、細胞賦活試験、ヒアルロン酸測定、酸性ムコ多糖測定
関節炎改善効果評価試験
 モデル作製:コラーゲン誘導性関節炎マウス
 評価指標:関節炎スコア、組織学的解析、炎症性因子の定量

筋肉低下の改善作用を知りたい
骨格筋増強・萎縮抑制評価試験
 使用細胞:マウス横紋筋由来C2C12筋芽細胞株
 評価指標:ミオシン重鎖(MHC)染色、タンパク質の合成マーカー(mTOR-4E-BP1系)・分解マーカー(オートファジー系およびユビキチン-プロテアソーム系)、タンパク質分解関連遺伝子 (Atrogin-1、Murf-1)
不活動性筋萎縮改善効果評価試験
 モデル作製:尾懸垂によるマウスの後肢の不活動
 評価指標:筋肉量、筋力、タンパク質の合成・分解マーカー
老化促進マウスを用いるサルコペニア改善効果評価試験
 モデル作製:老化促進モデルSAMP8マウス
 評価指標:筋肉量、筋力、タンパク質の合成・分解マーカー


脳神経系

認知機能・メンタルヘルス改善機能を評価したい
神経細胞機能評価試験、神経栄養因子産生促進試験
 使用細胞:マウスミクログリアBV2細胞・PC12細胞
 評価指標:BDNF、NGF、NT-3など神経栄養因子の産生、神経様突起長および本数、過酸化水素(H2O2)/アミロイドβ毒性回避試験、ドーパミン産生
社会的ストレス負荷試験
 モデル作製:単独隔離/過密/対面など社会的ストレスマウスモデル
 評価指標:血中コルチコステロン、血中DNA酸化的損傷

ダイエット効果・抗肥満作用を調べたい
リパーゼ活性阻害評価試験
 評価指標:試験物質のリパーゼ阻害率を IC50で算出
脂肪細胞の脂質蓄積、脂質分解評価試験
 使用細胞:マウス前駆脂肪細胞(3T3-L1)
 評価指標:脂肪滴蓄積量、遊離グリセロール量、アディポネクチン、脂肪酸合成酵素、脂肪細胞トリアシルリパーゼ活性
ミトコンドリア機能賦活評価試験
 使用細胞:3T3-L1細胞、C2C12細胞
 評価指標:褐色化関連遺伝子、ミトコンドリアDNA定量、脱共役タンパク質定量
肥満マウス体脂肪蓄積試験
 モデル作製:食餌性肥満誘導マウスモデル
 評価指標:経時的な体重変化、体脂肪量、血中脂質
食欲抑制ホルモン分泌試験
 使用細胞:腸内分泌細胞株STC-1
 評価指標:コレシストキニン(Cholecystokinin)、GLP-1定量


ホルモンと代謝系(内分泌疾患と代謝性疾患)

血糖値低下作用を知りたい
グルコース取り込み試験
 使用細胞:骨格筋細胞、脂肪細胞
 評価指標:細胞内への糖取込量、グルコーストランスポーター発現
マウスを用いる耐糖能評価試験
 評価指標:経口ブドウ糖負荷試験(OGTT)、インスリン負荷試験(ITT)

性ホルモン産生促進作用を調査したい
テストステロン産生能評価試験
 使用細胞:マウスLeydig細胞株
 評価指標:テストステロン産生能
雌性マウスストレス性生殖障害改善評価試験
 モデル作製:エンドトキシン投与により卵巣機能を抑制
 評価指標:血中エストロジェン、プロジェステロン濃度

免疫系への影響を知りたい
アレルギー反応(脱顆粒反応)抑制試験
 使用細胞:ラット肥満細胞(RBL-2H3)
 評価指標:遊離ヒスタミン、hexosaminidase定量
免疫機能調節試験
 使用細胞:マウス RAW264.7マクロファージ細胞株、マウス初代免疫細胞
 評価指標:貪食活性、サイトカイン産生
各種細胞を用いる抗炎症効果評価試験
 細胞モデル:目的細胞にLPS添加による炎症惹起
 評価指標:NO産生、炎症性サイトカイン産生


美白・美容系

メラニン産生抑制試験(美白評価)
 使用細胞:マウスマウスB16メラノーマ細胞(B16 melanoma)、ヒトメラノサイト
 評価指標:被験物質のメラニン産生抑制効果
チロシナーゼ活性阻害試験(美白評価)
 評価指標:被験物質のメラニン合成抑制剤の効果
コラーゲン・ヒアルロン酸産生試験(シワの改善など肌の美容)
 使用細胞:ヒト線維芽細胞(fibroblast)
 評価指標:Ⅰ型コラーゲンやヒアルロン酸産生促進効果
コラゲナーゼ活性阻害試験(シワの改善など肌の美容)
 評価指標:被験物質のコラーゲンを分解する酵素コラゲナーゼ抑制効果
セラミド(ceramide)・フィラグリン(filaggrin)産生試験(肌の保湿やバリア機能)
 使用細胞:正常ヒト表皮角化細胞(keratinocyte)
 評価指標:プロフィラグリン遺伝子・セラミド合成遺伝子群、セリンパミルトイルトランスフェラーゼ(SPT)遺伝子発現量
肌と角膜の乾燥ストレス保護試験
 使用細胞:ヒト不死化角膜上皮細胞、ヒト表皮細胞
 評価指標:タイトジャンクションをオクルディン抗体染色で観察
アトピー性皮膚炎改善試験
 細胞モデル:ヒト表皮角化細胞をアトピー性皮膚炎モデルへ誘導
 評価指標:炎症性サイトカイン産生、遺伝子発現量
創傷治癒試験
 使用細胞:正常ヒト表皮角化細胞、正常ヒト線維芽細胞
 評価指標:細胞遊走能

脱毛・薄毛
毛乳頭細胞の活性化試験
 使用細胞:正常ヒト毛乳頭細胞
 評価指標:細胞賦活能
毛髪形成促進試験
 使用細胞:正常ヒト毛乳頭細胞
 評価指標:毛母細胞の細胞分裂に関わるFGF(線維芽細胞増殖因子)-7、血管新生を促進VEGF(血管内皮細胞増殖因子)の産生


その他の非臨床試験・解析系

活性酸素産生評価試験
アポトーシス誘導試験
オートファジー促進試験
iPS細胞を用いた試験
ニュートリゲノミクス(網羅的遺伝子発現解析)
被験品の摂取における血液・尿・毛髪等の検体評価

分子生物学的アッセイ
遺伝子発現解析
遺伝子産物(タンパク質)・代謝産物の測定

イメージング
蛍光顕微鏡を用いた細胞の蛍光観察(バイオイメージング)
キーエンスの蛍光顕微鏡BZ-X700を用いた蛍光観察
タイムラプスイメージング
ハイコンテントスクリーニング

プレートリーダー
蛍光・発光・吸光のプレートリーダーによる測定

フローサイトメトリー
フローサイトメトリーのオーダーメイド試験
セルソーティング・オーダーメイド試験

臨床試験
 ダイエット効果検証試験
  試験デザイン:前後比較試験・クロスオーバー試験
 ストレス軽減効果検証試験
  試験デザイン:前後比較試験
 口腔ケア・口臭改善評価試験
  試験デザイン:
前後比較試験
 脳機能改善評価試験
  試験デザイン:前後比較試験
 睡眠改善効果評価試験
  試験デザイン:前後比較試験・クロスオーバー試験
 尿酸値低減効果評価試験
  試験デザイン:前後比較試験・クロスオーバー試験
 育毛効果の評価試験
  試験デザイン: 前後比較試験

オーダーメイドの動物試験

オーダーメイドの臨床試験

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